Nøkkelforskjell - Flowcytometri vs FACS

I sammenheng med celle teori er celler den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cellesortering er en metodikk som brukes til å skille forskjellige celler i henhold til de fysiologiske og morfologiske trekkene. De kan ha intracellulære eller ekstracellulære egenskaper. Interaksjon mellom DNA, RNA og proteiner blir betraktet som intracellulære interaktive egenskaper, mens form, størrelse og forskjellige overflateproteiner anses som ekstracellulære egenskaper. I moderne vitenskap har cellesorteringsmetodologier ført til å hjelpe den forskjellige undersøkelsen i biologiske studier og også i etablering av nye prinsipper gjennom forskning på medisin. Cellesortering utføres på forskjellige metodologier som inkluderer både primitivt med mindre utstyr og avanserte teknologiske metoder med bruk av sofistikert maskineri. Flowcytometri, fluorescerende aktivert cellesortering (FACS), magnetisk cellevalg og enkeltcellsortering er de viktigste metodene som benyttes. Flowcytometri og FACS er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper. FACS er en spesialisert type flytcytometri. Flowcytometri er en metodikk som benyttes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess der en prøveblanding av celler blir sortert i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er nøkkelforskjellen mellom flowcytometri og FACS.

INNHOLD

1. Oversikt og nøkkelforskjell 2. Hva er flowcytometri 3. Hva er FACS 4. Likheter mellom strømningscytometri og FACS 5. Sammenligning side ved side - Flowcytometri vs FACS i tabellform 6. Sammendrag

Hva er flowcytometri?

Flowcytometri er en metode som brukes til å undersøke og bestemme ekspresjonen av intracellulære molekyler og celleoverflaten og for å definere og karakterisere forskjellige celletyper. Det brukes også til å bestemme cellevolumet og cellestørrelsen og for å evaluere renheten til subpopulasjoner som er isolert. Dette tillater evaluering av flere parametere av enkeltceller omtrent samtidig. Flowcytometri brukes til å måle intensiteten av fluorescens som produseres på grunn av fluorescerende merkede antistoffer som hjelper til med å identifisere proteiner eller ligander som binder seg til tilknyttede celler.

Generelt inkluderer flytcytometri hovedsakelig tre undersystemer. De er fluidikken, elektronikken og optikken. I flowcytometri er fem hovedkomponenter tilgjengelige som brukes i cellesortering. De er en strømningscelle (en strøm av væske som brukes til å transportere dem og justere cellene for optisk sensing), et målesystem (kan være av forskjellige systemer inkludert kvikksølv- og xenonlamper, vannkraft med høy effekt eller luftkjølte lasere eller diodelasere med lav effekt), en ADC; Analog til digital omformersystem, forsterkningssystem og en datamaskin for analyse. Anskaffelsen er prosessen der dataene blir samlet inn fra prøvene ved bruk av flowcytometer. Denne prosessen er formidlet av en datamaskin som er koblet til flowcytometeret. Programvaren som finnes på datamaskinen analyserer informasjonen som mates til datamaskinen fra flowcytometeret. Programvaren har også muligheten til å justere parametere for eksperimentet som kontrollerer flowcytometeret.

Hva er FACS?

I sammenheng med Flowcytometri er fluorescensaktivert cellesortering (FACS) en metode som blir brukt i å differensiere og sortere en prøve av en blanding av biologiske celler. Cellene skilles fra to eller flere beholder. Sorteringsmetoden er basert på de fysiske egenskapene til cellen som inkluderer lysspredning og fluorescensegenskaper til cellen. Dette er en viktig vitenskapelig teknikk, som kan brukes til å oppnå pålitelige kvantitative og kvalitative resultater av fluorescenssignaler som sendes ut fra hver celle. Under FACS, innledningsvis, den forhånds oppnådde blanding av celler; en suspensjon rettes til sentrum av en smal væskestrøm som strømmer raskt. Væskestrømmen er designet for å skille cellene i suspensjonen basert på diameteren til hver celle. En vibrasjonsmekanisme påføres suspensjonsstrømmen som resulterer i dannelse av individuelle dråper.

Systemet er kalibrert for å lage en enkelt dråpe med en celle. Rett før dannelsen av dråper beveger strømningssuspensjonen seg langs et fluorescensmåleapparat som oppdager fluorescenskarakteristikken til hver celle. Ved dannelsen av dråper plasseres en elektrisk ladningsring som en ladning induseres til ringen før måling av intensiteten av fluorescens. Når dråpene er dannet fra suspensjonsstrømmen, blir en ladning fanget i dråpene som deretter går inn i et elektrostatisk avbøyningssystem. I følge siktelsen leder systemet dråpene til forskjellige containere. Metoden for påføring av ladningen varierer i henhold til forskjellige systemer som brukes i FACS. Utstyret som brukes i FACS er kjent som en fluorescensaktivert cellesorterer.

Hva er likheten mellom flowcytometri og FACS?


  • Flowcytometri og FACS er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper.

Hva er forskjellen mellom flowcytometri og FACS?

Sammendrag - Flowcytometri vs FACS

Cellen er den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cellesortering er prosessen der celler isoleres og differensieres i forskjellige kategorier basert på deres intracellulære og ekstracellulære egenskaper. Flowcytometri og FACS er to viktige metoder for cellesortering. Begge prosesser er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper. Flowcytometri er en metodikk som benyttes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess der en prøveblanding av celler blir sortert i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er forskjellen mellom Flowcytometri og FACS.

Last ned PDF-versjonen av Flow Cytometry vs FACS

Du kan laste ned PDF-versjon av denne artikkelen og bruke den for frakoblede formål som per sitasjonsnotat. Last ned PDF-versjon her Forskjell mellom flowcytometri og FACS

Henvisning:

  1. Flowcytometri (FCM) / FACS | Fluorescens-aktivert cellesortering (FACS). Fått tilgang til 22. september 2017. Tilgjengelig her Ibrahim, Sherrif F., og Ger van den Engh. “Flowcytometri og cellesortering.” SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1. januar 1970.. Åpnet 22. september 2017. Tilgjengelig her

Bilde høflighet:


  1. 'Cytometer'By Kierano - Eget arbeid, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia' Fluorescence Assisted Cell Sorting (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Utvikling av et in vitro modellsystem for å studere samspillet mellom Equus caballus IgE med sin høye affinitet FcεRI-reseptor (PhD-avhandling), University of Sheffield, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia